Характеристика штаммов Escherichia coli, компонентов Symbioflor 2

Комментарий подготовлен компанией SymbioPharm GmbH
T. Wassenaar, MMGC, Zotzenheim, Germany
Зотценхайм, 29 марта 2004 г.

Методы определения типов, доступные для E. coli, базируются на фенотипах: специфические морфологические, структурные или биохимические свойства, которые вытекают из экспрессии генов. Одним из старейших методов  с доказанной ценностью является серологическое типирование. Другими фенотипическими методами, применяемыми к E. coli, являются, гемолитическая активность, агглютинация эритроцитов и резистентность к антибиотикам. Результаты определения подтипов бактериальных изолятов (культур бактерий) обычно заслуживают больше доверия, если они получены с помощью, по меньшей мере, двух независимых методов.
Symbioflor 2 содержит жизнеспособные клетки E. coli. Штаммы бактерий первоначально были выделены из испражнений здоровых людей и идентифицированы как S2/01/ до S2/10/ с добавлением двух последних цифр, обозначающих год отбора серии образцов. Следовательно, S2/01/99 является тем же самым штаммом, что и S2/01/00 с сериями образцов, созданными соответственно в 1999 году и 2000 году.
Symbioflor 2 представляют как препарат, укреп-ляющий иммунную систему, особенно иммунную систему слизистых оболочек. Поскольку он содер-жит жизнеспособные бактерии, ряд процедур по оп-ределению типа провели в различных лаборатори-ях, чтобы доказать, что эти бактерии ни в коей мере не являются патогенными. Данный документ сравнивает результаты этих тестов на изменчивость (аберрантность). Была проведена и фенотипическая, и генотипическая характеристика.
Две независимые лаборатории выполнили опи-сание десяти штаммов E. coli, которые составляют препарат Symbioflor 2. При сравнении полученных данных с серотипами известных патогенных типов (патотипов) очевидно, что ни один из штаммов препарата Симбиофлор 2 не принадлежит к патогенному серотипу. Семь штаммов потеряли свой О-антиген, а у одного из них недоставало К-антигена. Окончательный бактериальный продукт после смешанного культивирования всех 10 штам-мов был также подвержен серотипической характе-ристике. Эксперимент выполнялся вслепую по за-просу с целью определения количества различных штаммов, которые можно идентифицировать. Ре-зультаты, полученные посредством конечного про-дукта, соответствуют предполагаемому количеству серотипов, которые можно идентифицировать.
Пять из десяти штаммов оказались гемолитиче-скими и на пластинках крови человека, и на пла-стинках крови овцы. Результаты из другой лабора-тории дали основание предположить, что эта актив-ность происходит благодаря энтерогемолизину, а не альфа-гемолизину. Это подкрепляется наблюдаемым отличием в гемолитической зоне на кровяных пластинках. На основании этих данных предполагают, что гемолитическая активность штаммов E. coli очень слабая и находится ниже пределов чувствительности реактива, согласно результатам нескольких лабораторий. На основании этих результатов, можно сделать вывод, что продукт Symbioflor 2 изготавливается из 10 бактериальных штаммов, которые принадлежат, по меньшей мере, к 5, а, возможно, 6 клонам.
Проведенные исследования позволяют сделать вывод о том, что штаммы, составляющие Symbioflor 2, были характеризованы с помощью широкого разнообразия методов при определении фенотипических, или генотипических характеристик. Результат всех этих тестов в значительной степени был таков: свойства вирулентности отсутствуют, или, в случае гемолитической активности, очень слабые. Следует подчеркнуть, что штаммы E. сoli имеющие одно свойство вирулентности, такое как гемолитическая экспрессия, часто изолируют из испражнений здоровых людей. Также следует подчеркнуть, что большинство людей переносят антитела против hlyA в своей крови, так что низкая экспрессия этого антигена не будет следствием повышенного риска инфекции. В заключение, этот продукт принимают тысячи людей в течение десятилетий, при этом побочные эффекты не обнаружены. На основании научного доказательства можно сделать такой вывод: штаммы, составляющие Symbioflor 2, охарактеризованы в достаточной степени и могут считаться безопасными.